AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：Sirt-1调节生理过程并对氧化应激发挥保护作用。

最近的研究表明，Sirt-1表达降低分别与阿尔茨海默病(AD)和抑郁症之间存在相关性，这表明Sirt-1表达改变在神经元退行性疾病（如AD和抑郁症）中可能具有致病作用。然而，Sirt 1减少如何损害神经元功能的分子机制仍然未知。本研究使用SK-N-SH神经母细胞瘤细胞来研究Sirt-1表达对神经元细胞生理作用的作用。通过瞬时转染Sirt-1表达质粒来获得Sirt-1。Sirt-1特异性shRNA用于阐明Sirt-1功能丧失的作用。CCK-8 (Cell Counting Kit-8)测定和流式细胞术用于评估细胞增殖。半定量蛋白质印迹用于检测相对蛋白质水平。采用进一步的荧光素酶报告基因测定来检查Sirt-1表达对p53转录活性的影响。RT-qPCR用于确定p21、Bax和Bcl-2的mRNA水平，它们是p53的下游靶基因。

结果表明，Sirt-1抑制p53下游基因p21转录，而shRNA介导的Sirt-1敲低导致p21表达显著增加，这意味着Sirt-1可能通过抑制p53转录活性促进神经元增殖。p53的mRNA和蛋白质水平不受Sirt-1表达改变的影响，这表明Sirt-1调节p53的转录调节活性而不是p53表达。事实上，我们进一步证实，Sirt-1似乎通过减弱其乙酰化来抑制p53转录活性，并导致p53与p21启动子的结合减少。过表达的Sirt-1用H2O2清除了SK-N-SH中活性氧(ROS)的产生。击倒Sirt-1呈现相反的效果；添加EX527（Sirt-1抑制剂）增加了ROS的积累。总之，氧化应激诱导神经元细胞中的Sirt-1，Sirt-1促进SK-N-SH细胞的增殖，这可能通过抑制p53的转录活性来保护它们免受氧化应激诱导的细胞死亡。这些结果提供了一个分子解释，说明减少的Sirt-1如何潜在地导致AD和抑郁症相关疾病，支持Sirt-1可能用作AD和抑郁症的诊断生物标志物和/或治疗药物靶点的观点。

Cell Counting Kit-8（Abmole，M4839）被用于检测细胞的增殖能力。

Figure 1: Sirt-1 positively promotes cell proliferation in SK-N-SH cells.

重要的是，通过CCK-8方法分析，抑制Sirt-1表达导致SK N-SH细胞增殖显著降低（图1（c））。相反，过表达Sirt-1显著增强了细胞生长。当细胞活力显著增强时，增殖阳性细胞增加，Sirt-1似乎通过促进其细胞周期进程来促进SK-N-SH细胞生长，因为G1/G0和S或M细胞显著减少相增加（图1（e）），表明Sirt-1通过调节细胞周期影响细胞增殖水平。这些结果表明，Sirt-1是神经元细胞增殖的正调节剂，并通过增强细胞周期进程或抑制细胞凋亡或两者兼而有之来促进细胞生长。

鸣谢：Lei Liu, et al. Biomed Res Int. 2021 Mar 23;2021:5542545.