四个品牌的细胞消化酶实验评测

盼山的备忘录 2024-09-13 13:06:49
间充质干细胞(MSC)是贴壁培养,在细胞培养扩增的过程中,需要用到一些细胞消化酶来解离间充质干细胞和培养瓶/微载体,使得间充质干细胞从培养瓶/微载体上脱离下来,再进行下一步的生产操作。那么,这里就面临着第一个问题,那就是这些消化酶对干细胞的损伤有多大?第二个问题,不同品牌供应商的消化酶对干细胞的损伤是否有不同程度的差异?首先,理论上所有的消化酶对细胞都有一定程度上的损伤,所以我们经常碰到培养细胞的时候,培养瓶里面总有一些小白点的存在,这些小白点就是死亡的细胞。那么,我们就需要确定哪个品牌的消化酶对间充质干细胞的损伤最小?基于这个思路,我们选取了常见的4个品牌的消化酶进行比较实验。为了避免广告的嫌疑,隐去品牌方信息,而且建议所有的细胞实验室都重复这样的比较实验,从而选择出适合自己培养体系的消化酶。细胞消化酶资料:

评价指标:消化后细胞形态和细胞生长能力的恢复。简要实验流程:

1. 取状态良好的同一个脐带来源和同一批次的间充质干细胞,吸弃培养基,D-hank‘s 缓冲液洗1次;

2. 加入不同品牌的细胞消化酶液体,覆盖细胞即可,室温观察;

3. 待细胞回缩变圆时,加入说明书里面所对应的终止液或缓冲液或培养基;

4. 收集细胞悬液,离心(1700rpm,5min);

5. 弃上清,用完全培养基重悬,计数,按照1:3传代培养;

6. 48小时使用对应消化液消化细胞,Countstar细胞计数仪分析细胞直径数据,根据计数结果来比较消化后增殖能力。

实验结果:

从评测结果来看,A品牌和D品牌的消化酶表现最好,对间充质干细胞的损伤最小,间充质干细胞的增殖生长能力恢复很好。

所以,选择一款合适的细胞消化酶,对间充质干细胞的生长培养有很重要的影响,能很大程度上减少消化酶对细胞的损伤,从而更大程度上确保了干细胞的功能活性。

0 阅读:0