间充质干细胞（MSC）是贴壁培养，在细胞培养扩增的过程中，需要用到一些细胞消化酶来解离间充质干细胞和培养瓶/微载体，使得间充质干细胞从培养瓶/微载体上脱离下来，再进行下一步的生产操作。那么，这里就面临着第一个问题，那就是这些消化酶对干细胞的损伤有多大？第二个问题，不同品牌供应商的消化酶对干细胞的损伤是否有不同程度的差异？首先，理论上所有的消化酶对细胞都有一定程度上的损伤，所以我们经常碰到培养细胞的时候，培养瓶里面总有一些小白点的存在，这些小白点就是死亡的细胞。那么，我们就需要确定哪个品牌的消化酶对间充质干细胞的损伤最小？基于这个思路，我们选取了常见的4个品牌的消化酶进行比较实验。为了避免广告的嫌疑，隐去品牌方信息，而且建议所有的细胞实验室都重复这样的比较实验，从而选择出适合自己培养体系的消化酶。细胞消化酶资料：

评价指标：消化后细胞形态和细胞生长能力的恢复。简要实验流程：

1. 取状态良好的同一个脐带来源和同一批次的间充质干细胞，吸弃培养基，D-hank‘s 缓冲液洗1次；

2. 加入不同品牌的细胞消化酶液体，覆盖细胞即可，室温观察；

3. 待细胞回缩变圆时，加入说明书里面所对应的终止液或缓冲液或培养基；

4. 收集细胞悬液，离心（1700rpm，5min）；

5. 弃上清，用完全培养基重悬，计数，按照1:3传代培养；

6. 48小时使用对应消化液消化细胞，Countstar细胞计数仪分析细胞直径数据，根据计数结果来比较消化后增殖能力。

实验结果：

从评测结果来看，A品牌和D品牌的消化酶表现最好，对间充质干细胞的损伤最小，间充质干细胞的增殖生长能力恢复很好。

所以，选择一款合适的细胞消化酶，对间充质干细胞的生长培养有很重要的影响，能很大程度上减少消化酶对细胞的损伤，从而更大程度上确保了干细胞的功能活性。