AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：PI3K/AKT信号通路的抑制作用通过抑制BAG3使DLBCL细胞对蛋白酶体抑制剂的治疗敏感 。

蛋白酶体抑制剂代表一类新型药物，对血液和实体癌症类型具有临床疗效，包括急性髓细胞白血病，骨髓增生异常综合症和非小细胞肺癌。已经证明，蛋白酶体抑制剂可在多种癌细胞中诱导抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤2相关的致癌基因3（BAG3），并在化疗耐药性中发挥重要作用。磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT）途径在许多淋巴样恶性肿瘤中被组成性激活，包括DLBCL和Burkitt淋巴瘤。在本研究中，目的是阐明在DLBCL细胞系中暴露于蛋白酶体抑制剂后，PI3K/AKT信号通路在BAG3诱导中的作用。硼替佐米和MG132被用作蛋白酶体抑制剂。 Western印迹法用于评估蛋白酶体抑制剂和PI3K/AKT途径在DLBCL细胞（LY1和LY8）的BAG3诱导中的作用，而LY294002用于阻断PI3K/AKT途径。使用细胞计数试剂盒8检测法检测细胞活力。通过膜联蛋白V/7-氨基放线菌素D流式细胞仪定量测定LY1和LY8细胞的凋亡。当暴露于硼替佐米和MG132时，以剂量依赖性方式明显诱导了BAG3蛋白。 PI3K/AKT抑制剂LY294002显着抑制了蛋白酶体抑制剂对BAG3的诱导。 PI3K/AKT途径的抑制降低了蛋白酶体抑制剂诱导的增殖并增加了凋亡。目前的结果表明，PI3K/AKT通路与DLBCL细胞中BAG3表达的激活有关，并且参与了针对蛋白酶体抑制的保护反应。

MG132（Abmole，M1902，纯度100.0%）被用做蛋白酶抑制剂。

Figure 1. Effects of proteasome inhibition on the expression of BAG3. The BAG3 protein was induced by bortezomib and MG132 in a dose-dependent manner.

如图1所示，在LY1和LY8细胞系中，以一定剂量暴露于硼替佐米（10、20、40和80 nM）和MG132（1、2、4和8 µM）后会显著以剂量依赖方式诱导BAG3蛋白。

Figure 2. Effects of proteasome inhibition and phosphoinositide‑3‑kinase/RAC‑α serine/threonine‑protein kinase pathway inhibition on cell viability.

图2A-C描述了硼替佐米，MG132和LY294002以浓度依赖的方式抑制了细胞活力。硼替佐米，MG132和LY294002在LY1细胞中的IC50分别为45 nM，4.5和12 µM。在LY8细胞中，硼替佐米，MG132和LY294002的IC50分别为42 nM，4.5和13 µM。因此，选择40 nM硼替佐米，4 µM MG132和10 µM LY294002作为以下实验的工作浓度。与单独的治疗相比，与硼替佐米和MG132组合使用时，PI3K/AKT途径抑制剂LY294002显着降低了细胞活力（图2D； P <0.05），表明PI3K/AKT途径在DLBCL细胞对蛋白酶体的耐受性中起作用 抑制剂。

鸣谢：Ting Yuan, et al. Oncol Lett. 2019 Apr;17(4):3719-3726.