AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：肌球蛋白重链 10 (MYH10) 基因沉默通过抑制 Wnt/b-Catenin 通路减少U251、T98G 和 SHG44 中的细胞迁移和侵袭。

肌球蛋白重链 10 或 MYH10 基因编码非肌肉肌球蛋白 II B (NM IIB)，并参与肿瘤细胞迁移、侵袭、细胞外基质 (ECM) 产生和上皮间质转化 (EMT)。本研究旨在通过基因沉默研究 MYH10 基因对体外正常人神经胶质细胞和神经胶质瘤细胞系的影响，并确定所涉及的信号通路。本研究研究了正常人神经胶质细胞系 HEB 和神经胶质瘤细胞系 U251、T98G 和 SHG44。质粒转染使 MYH10 基因沉默。细胞计数试剂盒-8 (CCK-8) 测定评估细胞活力。使用划痕和 transwell 测定评估细胞迁移和侵袭。 Western blot检测蛋白表达水平，实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测mRNA表达水平，对于MYH10、转移相关蛋白1（MTA-1）、基质金属蛋白酶（MMP） )-1、MMP-9、金属蛋白酶 2 (TIMP2)、胶原蛋白 1、E-钙粘蛋白、波形蛋白、Wnt3a、b-连环蛋白和细胞周期蛋白 D1 的组织抑制剂。

研究结果表明，MYH10 基因在 U251、T98G 和 SHG44 细胞中过表达。在 siMYH10 质粒干扰后，MYH10 表达下调，这也抑制了胶质瘤细胞的迁移和侵袭。 MYH10 基因沉默导致 MTA-1、MPP-2、MMP-9 和波形蛋白的表达降低，TIMP-2、E-钙粘蛋白和胶原蛋白 1 在蛋白质和 mRNA 水平的表达增加，并抑制 Wnt/b-连环蛋白途径。总之，在人神经胶质瘤细胞系中，沉默 MYH10 基因通过抑制 Wnt/b-catenin 通路来减少细胞迁移和侵袭，这可能调节人神经胶质瘤中的 ECM 并抑制 EMT。

Phosphatase inhibitors（Abmole，M7528）被用于防止研究中蛋白和脂类的磷酸化状态丢失，为蛋白磷酸化提供更加全面的保护，以更好地进行Western blot等实验。

Figure 1. Expression of the MYH10 mRNA and protein in U251, T98G, and SHG44 glioma cell lines.

结果表明，MYH10基因在HEB和胶质瘤细胞中均有表达，但MYH10基因在U251、T98G和SHG44胶质瘤细胞系中的相对表达水平显著高于HEB细胞系（P<0.05）。 与U251和SHG44胶质瘤细胞系相比，T98G胶质瘤细胞中MYH10基因的相对表达水平显着升高（P<0.05）。

Figure 2. Effects of siMYH10 plasmid interference on the expression levels of MYH10 cell viability, cell motility, and cell invasion of the T98G human glioma cell line.

结果显示转染后MYH10 mRNA和蛋白表达水平显着降低（P<0.01）。这些发现证实质粒构建和转染是成功的。

鸣谢：Yang Wang, et al. Med Sci Monit. 2018 Dec 15;24:9110-9119.