AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：双酚AF通过雌激素受体(ERβ)和ROS-ASK1-JNK MAPK通路诱导人颗粒细胞系KGN细胞凋亡

双酚AF (BPAF)是一种新兴的环境污染物。虽然BPAF在环境和人类环境中广泛存在，但其对卵巢功能的干扰尚未完全理清。本研究旨在探讨BPAF对KGN细胞凋亡的影响机制，从而维持卵巢颗粒细胞的生理特性。结果表明，BPAF可诱导KGN细胞凋亡，并呈浓度依赖性和时间依赖性。同时，BPAF暴露显著提高促凋亡蛋白Bax、Bid、Bak的表达，而抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1的表达显著降低。研究人员进一步检测到高浓度BPAF暴露后细胞内ROS水平显著升高。阻断相应的通路后，发现ROS介导ASK1和JNK的激活。此外，通过使用抑制剂也证实了Ca2+超载和雌激素受体β (ERβ)在BPAF诱导的KGN细胞凋亡中的作用。这些结果表明BPAF对女性具有潜在的生殖毒性，ROS-ASK1-JNK轴可能在BPAF诱导的卵巢功能障碍中起关键作用。此外，Ca2+超载和ERβ通路激活也可能是BPAF生殖毒性的重要机制。

U0126-EtOH (M1977，纯度：99.56%) 是一种高度选择性的MEK1/2抑制剂，IC50为0.07 μM/0.06 μM，作用于N3-S218E/S222D MEK比PD098059亲和力强100倍。SB203580 (M1781，纯度 99.97%) 是一种p38 MAPK抑制剂，IC50为0.3-0.5 μM，与SAPK3(106T)和SAPK4(106T)相比选择性低10倍，且抑制PKB磷酸化，IC50为3-5 μM。 SP600125 (M2076，纯度 99.73%) 是一种广谱JNK抑制剂，作用于JNK1， JNK2和JNK3时，IC50分别为40 nM， 40 nM和90 nM，比作用于MKK4选择性高10倍，比作用于MKK3， MKK6， PKB，和PKCα选择性高25倍，比作用于ERK2， p38， Chk1， EGFR等选择性高100倍。LY294002 (M1925，纯度 99.84%) 是第一个人工合成的PI3Kα/δ/β的抑制剂，IC50分别为0.5 μM/0.57 μM/0.97 μM，在溶液中比在Wortmannin中稳定，也能够抑制自噬体的形成。G15 (M7871，纯度 100%) 是一种高亲和力和选择性G蛋白偶联雌激素受体 (GPER/GPR30) 拮抗剂，Ki值为20 nM。BAPTA-AM (M4973，纯度99.09%) 是一种选择性的，膜渗透性的钙螯合剂。Z-VAD-FMK (M3143，纯度99.47%) 是一种可渗透细胞的，不可逆pan-caspase抑制剂，抑制细胞凋亡的全部特性。

研究中，作者考察了JNK MAPK信号通路是如何参与了BPAF诱导的KGN细胞凋亡。在流式检测中，使用了来自Abmole的U0126 (ERK1/2抑制剂，5 mM)、SB203580 (p38抑制剂，5 mM)、SP600125 (JNK抑制剂，5 mM)和LY294002 (AKT抑制剂，5 mM)预处理KGN细胞60 min，然后用流式细胞术检测BPAF暴露24 h后细胞凋亡的变化，获得了高质量的测试数据。

鸣谢：Huang M , Li X , Jia S , et al. Bisphenol AF induces apoptosis via estrogen receptor beta (ERβ) and ROS-ASK1-JNK MAPK pathway in human granulosa cell line KGN[J]. Environmental Pollution, 2020, 270:116051.