AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：天然产物果胶苷元通过PI3K/AKT/mTOR/ERK信号通路抑制增殖、诱导细胞凋亡并导致HCC G2/M期阻滞 。
HCC的特点是具有相当大的表型和分子异质性，但 HCC 患者的总体生存率仍然极低。因此，迫切需要新型有效的抗tumour药物替代品。Pectolinarigenin是一种黄酮类化合物提取物。然而，pectolinarigenin在 HCC 中的潜在抗tumour作用尚未明确阐述。在本研究中，我们研究了其在 HCC 治疗中的作用并探索了潜在的分子机制。本研究中，培养HCC细胞系SMMC7721和PLC5，并用指定浓度的果胶甙元处理。对于 HCC 细胞增殖，在用指定浓度的果胶苷元刺激 HCC 细胞后，在CCK-8和集落形成试验中检测到细胞活力。通过Transwell和伤口划痕方法进行HCC细胞侵袭/迁移测定。此外，使用流式细胞术分析进行细胞凋亡和细胞周期停滞分析。最后，涉及的潜在信号通路，PI3K/AKT/mTOR/ERK信号相关的分子标记物通过蛋白质印迹方法用指定的抗体检测。同时，还在荷瘤小鼠中评估了pectolinarigenin的抗tumour活性。
结果表明，果胶甙元处理以浓度和时间依赖性方式显着抑制SMMC7721和PLC5细胞的细胞增殖和迁移和侵袭能力。同时，果胶苷元显着诱导SMMC7721和PLC5细胞中的细胞凋亡和G2/M期阻滞，这分别与细胞凋亡和细胞周期相关蛋白水平相关。此外，pectolinarigenin抑制PI3K/AKT/mTOR/ERK信号通路。它还显着抑制了体内 HCC tumour的生长。Pectolinarigenin 可通过抑制PI3K/AKT/mTOR/ERK信号通路抑制liver cancer细胞系的活力和运动，并导致细胞凋亡和 G2/M 期停滞。这可能是一种有吸引力的 HCC 治疗潜在治疗剂。
Pectolinarigenin（Abmole，M4748，纯度>98%）被用于进行liver cancer细胞系SMMC772和PLC5培养，浓度为0, 5, 10, 25, 50, 100 µM。
Figure 1 Pectolinarigenin inhibited SMMC7721 and PLC5 cells’ viability, proliferation, migration, and invasive ability.
CCK8结果表明，Pectolinarigenin以时间和剂量依赖性的方式显著延缓SMMC7721和PLC5细胞的活力。菌落形成试验也显示，10µM Pectolinarigenin处理后，SMMC7721和PLC5细胞的菌落数量均少于对照组。Transwell和划痕分析结果显示，pectolinarigenin显著抑制侵袭和迁移。综上所述，pectolinarigenin能抑制SMMC7721和PLC5细胞的侵袭和迁移。
Figure 2 Pectolinarigenin caused apoptosis of SMMC7721 and PLC5 cells
如图2A所示，在pectolinarigenin处理的SMMC7721和PLC5细胞中，凋亡细胞的比例显著增加，分别从1.7%到16.0%和从5.3%到38.5%。与流式细胞仪结果相似，暴露于pectolinarigenin明显下调抗凋亡Bcl-2水平，上调促凋亡调节因子Bax的表达(图2C)。综上所述，pectolinarigenin通过Bcl-2/Bax/Caspase-3途径促进liver cancer细胞凋亡。
Figure 3 Pectolinarigenin caused G2/M phase arrest of SMMC7721 and PLC5 cells.
流式细胞术检测了Pectolinarigenin 对liver cancer细胞周期分布的影响。结果表明，用Pectolinarigenin 处理后，细胞周期出现典型的G2/M周期阻滞。SMMC7721和PLC5细胞G2/M期细胞比例均显著增加，分别为8.9% ~ 45.6%和14.4% ~ 42.0%。
Figure 4 Pectolinarigenin inhibited PI3K/AKT/mTOR/ERK signaling pathway
结果表明，在SMMC7721和PLC5细胞中，pectolinarigenin有效降低了PI3K、p-AKT、p-mTOR和p-ERK1/2蛋白水平。本研究结果提示，pectolinarigenin可能通过PI3K/AKT/mTOR/ERK信号通路抑制liver cancer细胞的增殖，并提示它可能是liver cancer治疗的另一种治疗策略。
鸣谢：Tianchun Wu, et al. Onco Targets Ther. 2018 Dec 3;11:8633-8642
