人皮肤成纤维(HSF)是皮肤真皮层中最主要的细胞,对于维持皮肤的弹性和张力具有重要的作用。HSF具有很强的蛋白质合成能力,可以合成并分泌大量弹性蛋白、胶原蛋白、糖胺多糖和糖蛋白等基质成分,进而生成弹性纤维、胶原纤维和网状纤维,分泌多种细胞修复因子,使得皮肤具有强大的更新与自我修复能力。
HSF具有分布广泛、取材方便,对机体损伤较小、体外培养容易成活、增殖较快等优点,因此被广泛应用于各类化妆品功效评价中。
· 人皮肤成纤维细胞与抗衰老功效评价
HSF衰老模型的检测指标包括细胞增殖、ROS、SOD、CAT和GSHPX指标、MMP表达、Ⅰ型胶原蛋白的表达以及衰老相关β-半乳糖苷酶的表达。
正常成人皮肤中HSF分泌的胶原主要以Ⅰ和Ⅲ 型为主。其中Ⅰ型胶原是构成正常成人皮肤的主体,Ⅰ型胶原蛋白约占70%,Ⅲ型胶原蛋白占30%,皮肤出现老化时,胶原蛋白含量逐渐降低,两者比例发生倒置,同时胶原变粗,出现异常交联。正常胎儿皮肤主要由Ⅲ型胶原组成,婴儿时期含量高达80%,Ⅲ型胶原蛋白又被称为“婴儿胶原”。
假如我们的皮肤是一张“床垫”,Ⅰ型胶原就是起着支撑作用的承重支柱,Ⅲ型胶原则是负责弹性的弹簧。Ⅰ型胶原蛋白粗大,决定着皮肤轮廓和硬度;Ⅲ型胶原蛋白是细密纤维状,决定皮肤的弹性和柔软。Ⅰ型胶原蛋白为可合成再生胶原,Ⅲ型胶原蛋白为不可再生胶原。
衰老细胞通常体积变大,溶酶体衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)酶活性增高。采用免疫组化法观察β-半乳糖苷酶染色细胞的颜色变化以及用比色法定量β-半乳糖苷酶活性,可以评估HSF衰老程度的变化。
· 纤维细胞与创面愈合功效
创面愈合是一个多种细胞及相关因子协同作用 ,对细胞外机制进行重构的过程。在皮肤出现创面后组织重新生成时,创口会产生大量的透明质酸。
外源施加高浓度、高分子量HA可与血纤蛋白组成凝块在创面愈合过程中发挥构造作用,也在创伤愈合的第二阶段即炎症阶段促进粒细胞吞噬活性,调节炎症反应。该反应与促进上皮细胞增殖、移动,促血管生成在创面修复过程中是部分交叉重叠的。同样,还可促进成纤维细胞的增殖、调控胶原合成,并在干燥窗口处滞留一定的水分,保持组织的水合状态,加快上皮化进程。
成纤维细胞主要位于皮肤真皮层中,具有较强的自我更新能力,是创面受损的主要修复细胞,它不仅可以合成和分泌大量胶原蛋白、弹性蛋白、透明质酸以及相关细胞修复因子,还能促进表皮细胞的迁移和增殖,从而达到创面愈合的目的。
细胞划痕实验又叫创伤愈合实验,当细胞生长至融合成单层状态时,在细胞层上人为制造一个空白区域,称为“划痕/伤口”,通过一段时间的培养,边缘的细胞会逐渐向无细胞区域迁移,使“伤口”愈合,通过测量细胞迁移距离及速度反映细胞的迁移能力及修复能力。
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