如何进行线粒体形态分析统计(四)

探索哒哒猫 2024-07-19 01:18:44
不懂就问有问必答 科研日常 科研 线粒体 线粒体形态是线粒体和细胞功能的关键决定因素。线粒体融合和分裂的平衡塑造了线粒体管网状结构。病理生理状况可能导致线粒体网络断裂或者异常延长,从而导致线粒体功能异常并损害细胞功能。所以线粒体形态的变化也是检测病理生理变化的一个指标。那么该如何进行线粒体形态分析检测并统计呢? [向右R][向右R][向右R]一般来说,细胞内各类形态的线粒体都有,生理状态下可能同时存在着tubular,fragmented等不同形态的线粒体,如果线粒体的变化主要是来自于形态上长短的变化,不同长短的线粒体直径和体积并没有明显变化和膨胀的话,可以以平均长度来表征线粒体的变化,拍摄时单一层面随机拍摄线粒体即可,我们前几篇笔记讲解了如何用MiNA插件来分析检测线粒体平均长度。这个适用于一般的贴壁细胞,而比较小的悬浮细胞或者贴壁免疫细胞更适合用Z轴拍摄并进行3D渲染来展示,分析统计上有另外的方法,我们回头再进行展示。 [向右R][向右R][向右R]当线粒体体积发生变化,线粒体平均直径明显改变,这个时候用平均长度来进行表征就不够严谨了,需要区分线粒体形态是肿胀的swollen还是片段化的fragmented,这两个相似点在于和tubular的线粒体相比,看起来明显都比较碎,没有明显的管网状形态。差别在于swollen的形态虽然也很碎,和tubular状态相比平均直径明显膨大肿胀,而fragmented的线粒体虽然也是碎点但体积相比swollen并不膨大,平均直径明显小于swollen状态,平均直接相对来说和tubular状态差别不大。所以在处理前后有swollen等变化时,有必要再进行线粒体平均直径的分析统计,并进行tubular,intermediated,swollen,fragmented等的形态区分。 [向右R][向右R][向右R]在进行线粒体形态分析统计时,线粒体标记很关键。合适的线粒体标记不能对细胞以及线粒体本身有毒性,并且可以展示处理前后线粒体形态的转变,这个转变在有Swollen这类变化时就显得尤为重要。我们特别推荐PK Mito系列的线粒体内膜染料,易染色,对一些线粒体致密比较难标记的原代心肌细胞,以及很小或者悬浮的免疫细胞,其他难做的原代细胞,间充质干细胞,胚胎细胞等都很适用,绝对是全球最佳线粒体染料,强烈推荐,Pick PK Mito,线粒体成像及形态分析事半功倍[点赞R][点赞R][点赞R]。 生物实验 研究生学习 线粒体形态分析 线粒体染料 PK Mito

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