不懂就问有问必答 科研 抑制剂 在生物实验中，我们常会遇到使用抑制剂来确定某些通路或者蛋白的功能和调控作用。这里面会有一个常规问题，即如何确定抑制剂是有效的？ [向右R][向右R][向右R]选择抑制剂时首先可以参考文献中的使用方法。在文献上提供的浓度和时间上在自己的实验体系可以再进行优化。 [向右R][向右R][向右R]抑制剂公司不止一个，根据自己的资金预算选择相应公司，一些常规抑制剂不同品牌都可以的，如果是细胞实验，需要确定抑制剂是否是细胞培养级别。另外公司在提供抑制剂时有的是无菌粉末，有的直接是溶液。如果是无菌粉末，首先看好抑制剂需要在什么样的溶液中进行溶解以及大概的溶解度是多少。比如说自噬抑制剂3-MA需要在DMSO溶解，且溶解度很低，即便买的液体，每次使用时也需要加热溶解。而溶酶体抑制剂氯喹CQ在灭菌水中溶解即可，但CQ也有不同种类，可以根据文献选择用于细胞水平的。 [向右R][向右R][向右R]配制好抑制剂后，或者直接买好的液体抑制剂，因为每次使用量有限，就需要进行分装以防止反复冻融失效。这里面需要特别说明，像有些自噬溶酶体抑制剂反复冻融很容易失效，最好小包装分装后放在负八十度长期保存，每次使用时取出放在负二十度，不要来回反复冻融使用。抑制剂是否可以放在负八十度，可以提前联系抑制剂公司技术支持进行询问。这里面特别说明一下，抑制剂是否适合分装也可以联系技术支持确定下。 [向右R][向右R][向右R]抑制剂使用时有提前孵育，共孵育以及收样前孵育一定时间等，那么抑制剂在自己的实验体系要如何使用呢？像一些很常规的自噬或者溶酶体抑制剂，收样前几个小时加抑制剂即可，而有些抑制剂则需要提前孵育或者共孵育，不管是那种方法，最好根据文献参考并在自己实验体系测试。 [向右R][向右R][向右R]需要特别注意的一点是有些抑制剂是可逆抑制剂，就如同我们图片上的可逆微管抑制剂，当我们按照文献中的孵育方法进行孵育后，确实发现可以解聚微管，但随着时间延长，解聚的微管又重新恢复。这类抑制剂就需要特别注意时间，在作用时间内来观察样品。