流式TUNEL法使得大规模、快速、准确地定量分析细胞凋亡成为可能。然而，在实际操作过程中，大家可能会遇到一系列问题，今天小E老师就带大家来进行流式TUNEL异常结果分析。 [斜眼R]细胞在发生凋亡时会激活一些DNA内切酶，这些内切酶可以使染色体DNA双链或者单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端，细胞经过固定破膜后，TdT酶（脱氧核糖核酸末端转移酶）将荧光标记的dUTP连接到因DNA断裂而暴露的3'-OH末端，通过流式细胞仪检测dUTP偶联物发出的荧光信号，从而来检测晚期凋亡。 与原位TUNEL相比，流式TUNEL灵敏度高，操作简单，能进行定性定量分析，尤其对于贴壁细胞来说，流式TUNEL可以收集到细胞上清中的晚凋细胞进行检测，结果更准确，因此，流式TUNEL成为了检测细胞凋亡最常用的方法之一。 首先我们要了解一下流式TUNEL染色步骤（P2） 此外，还需要做一些分组设置(P3) [皱眉R] 在进行流式TUNEL实验时，大家可能会遇到染色结果异常的问题，包括凋亡诱导组未检测到凋亡细胞群、细胞碎片较多、正常组阳性率高等，小E带大家来逐个击破。（P456）