质粒的保存温度主要取决于质粒的类型、大小以及预期的保存时间。
本期淼灵生物给大家分享一下一些常见的保存质粒的方法和温度~
一、短期保存
4℃:对于需要短期保存的质粒(数天或数周),可以放置在4℃的冰箱中。但这种方式不适用于长期保存,因为质粒在比较低但非冷冻的温度下可能会逐渐降解。
二、长期保存
-20℃:对于大多数质粒,特别是比较小的质粒(如5kb以下),-20℃是一个常用的长期保存的温度。在这个温度下,质粒可以稳定保存数年之久。质粒通常溶解在TE缓冲液或水中,并储存在无菌的EP管中。需要注意的是,虽然-20℃可以有效延长质粒的保存时间,但长期存放后质粒可能会发生一定程度的降解或变化。
三、特殊保存方法
乙醇保存:对于某些特别大的质粒或者需要特殊处理的质粒,可以将其纯化后放在70%~75%的乙醇中,并储存在-20℃或更低温度下,这种方法可以减少质粒在溶液中的碰撞和相互作用,从而降低降解和突变的风险。
四、注意事项
1.在保存质粒时,应确保使用的EP管或冻存管是无菌的,并且质粒溶液中没有DNA酶等污染物。
2.反复冻融会降低质粒的活性和质量,因此应尽量避免不必要的冻融操作。
3.如果需要长期保存质粒,建议定期检测质粒的质量和活性,以确保其稳定性和可用性。