无血清培养vs含血清培养之Hep-g2
新舟生物
2024-09-06 15:25:50
👍优选推荐试剂
CSP140 accutase
CSP145 鼠尾胶原蛋白I型溶液
CSP042 无血清细胞冻存液
CSP015 细胞解离液(特殊配制)
培养要点[种草R]
1.培养瓶需要用鼠尾胶原蛋白I型溶液包被:50微克鼠尾胶原蛋白I型溶液溶解于2.5mlPBS,转入T25中,培养瓶置于37°C 培养箱中。2小时后,吸除包被液,培养瓶用PBS 洗一次,然后接入细胞)。
传代时,须使用特配细胞解离试剂。
4.接种密度:1 x 105 viable cells/cm2
冻管细胞复苏:
冻管细胞在37°C水浴中迅速解冻(大约2分钟)。为了减少污染的可能性,保持冻管瓶盖 在水浴液面之上。 一旦大部分内容物解冻,立即将冻管移出水浴,70%的乙醇消毒冻管外壁,将内容物转移到含9mL完全培养基的离心管中,轻轻混匀,离心(125 x g,5至7分 钟)收集细胞。 细胞沉淀用5ml完全培养基重新悬浮,转移至T25培养瓶中,于培养箱中静置培养。当密度达到80%以上时传代。
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