(PE)小鼠模型的步骤通常包括以下几个关键环节 一、实验准备选择小鼠:选取体重适中(如20~26g)、品系纯正(如Balb/c小鼠)的小鼠,并确保其健康、无其他基础疾病或异常。准备工具和药物:手术刀、注射器、麻醉剂(如3%戊巴比妥钠)、溶栓药物(如组织型纤溶酶原激活剂tPA,但注意在特定建模方法中可能使用凝血酶而非溶栓药物)、制止出血的药物、缝线、生理盐水、活力碘消毒液、胶布、解剖板等
实验环境:确保手术室的无菌和温暖,准备好手术台、显微镜、手术器械等二、
小鼠麻醉与手术操作麻醉小鼠
使用适当的麻醉剂(如3%戊巴比妥钠,以80mg/kg剂量腹腔注射)使小鼠处于麻醉状态,确保麻醉的深度适中,不会对小鼠造成过多的伤害
消毒与固定
将小鼠取仰卧位,用胶布将四肢和头部固定在解剖板上,对颈部进行脱毛处理,并用活力碘消毒液消毒手术区域
切口与暴露血管
在颈部正中作切口,逐步分离软组织和肌肉,暴露左侧颈静脉
三、建模操作注射药物或栓子:凝血酶注射法:将凝血酶溶液(溶于0.9%生理盐水,剂量为20~75U/kg)通过注射器插入颈静脉中,并将其注射至肺动脉或其他合适的位置。确保药物注射的剂量和速度适当
血栓注射法:在体外制备好血栓(如血凝块),将其配置成血栓混悬液。通过注射器将含有一定数量血栓的混悬液注入颈静脉中
缝合伤口:小鼠体内药物或栓子注射完毕后,清理术野,将切口处进行缝合处理,确保伤口愈合
四、术后护理与观察术后护理:小鼠醒来后,将其放回到舒适的饲养环境中,并提供充足的水和食物。观察恢复情况:密切观察小鼠的恢复情况,包括行为表现、心率、呼吸频率等,及时采取必要的护理措施
记录实验数据:记录实验过程中的详细数据,包括手术操作细节、药物剂量、动物反应等
五、模型验证与评估大体观察:观察小鼠的肺部是否出现病变,如肺组织表面不光滑、肺表面有局灶性出血、渗出及水肿等
显微镜下观察:取小鼠的肺组织进行切片染色(如HE染色),观察肺内是否出现大量炎性细胞浸润、红细胞渗出等病理改变
行为学测试:可以进行开放场测试、心率和呼吸频率监测、主动避免测试等行为学检测实验来评估肺栓塞模型对小鼠行为的影响
请注意,以上步骤仅供参考