实验室省钱秘籍!!!🧪🎉
新舟生物
2024-10-28 00:10:42
培养基买送惊喜,让你的实验无忧!
细胞培养注意事项🌟
🔬 细胞消化时间:该细胞消化时间较长,大约需要5-10分钟。记得耐心观察,不要心急哦!
🧪 培养基选择:推荐使用我们提供的专用培养基,因为它是无血清的,细胞生长会慢一些,所以要有耐心。建议1:2的比例传代。
🚫 消化液使用:消化时不要用完全培养基作为终止液,要用0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂(货号:CSP002)来终止消化。
传代步骤📝
细胞收集:细胞脱落时,将培养液转移到无菌离心管中,125g离心3-5分钟,收集悬浮细胞。
消化贴壁细胞:用PBS洗1-2次,加入1mL胰酶(0.25%含EDTA),放入培养箱。观察细胞变圆后,加入5mL大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
细胞悬液处理:轻轻吹打6-8次,使细胞解离,转移到无菌离心管中,计数,离心收集细胞。
接种:用完全培养基重悬细胞,调整密度至每毫升0.6-2X10^6,转移到培养瓶中,静置培养。
细胞冻存步骤🧊
细胞准备:细胞密度80%以上,活细胞百分率达95%以上时,进行消化收集。
冻存液使用:用4°C冻存液(货号:CSP042)重悬细胞,建议一瓶T25细胞冻存一管(1mL/管)。
冷冻:直接放入-80℃超低温冰箱过夜,如需液氮保存,先在-80℃放置至少一天。
冻管细胞复苏🔄
取出细胞:从液氮中取出细胞,放入干冰中转移到细胞房。
解冻:在37°C水浴中迅速解冻1-2分钟,保持瓶盖在水面之上。
消毒与转移:70%乙醇消毒外壁,将内容物转移到含3-6mL完全培养基的离心管中,轻轻混匀,去除培养基,调整细胞密度后接种。
培养:转移至培养瓶中,静置培养,建议T25培养瓶添加5-7mL完全培养基。
📌 注意事项:如果不是我们提供的冻存液,请按照说明书操作。如果是自配冻存液,记得梯度降温或使用程序降温盒。
希望这些小贴士能帮助你在细胞培养的道路上越走越远!🌱🔬🧪
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