Hey小伙伴们，今天来聊聊A549-GFP细胞培养的那些事儿，希望能帮到正在实验室里奋斗的你哦！🌟 A549细胞小档案 来源：58岁白人男性肺癌组织 建立者：D.J. Giard等人，1972年特点：可以通过胞苷二磷酸胆碱途径合成高比例的不饱和脂肪酸卵磷脂。 培养须知&重点[哇R] GFP表达：A549细胞为稳定转染GFP的细胞，传代次数增加，GFP荧光强度会减弱。若需维持荧光强度，可加入嘌呤霉素进行筛选。 传代建议：收到细胞后至少传3代，冻存留种后再进行筛选。 筛选技巧：初次筛选时，建议加入1ug/ml嘌呤霉素的完全培养基，若无细胞漂浮或漂浮较少，可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的培养基继续筛选。显微镜下观察GFP荧光亮度，若细胞表达GFP高，使用2ug/ml维持培养即可。若亮度不足，可梯度递增添加嘌呤霉素进行筛选。 筛选注意：若筛选过程中漂浮细胞大于40%，则停止筛选，换成正常培养基培养，至细胞密度约80%，可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。 运输与复苏 温度要求：复苏后不耐低温和长时间运输，沿途最低温度需高于10摄氏度且运输路途不可过长。 冬天邮寄：常温邮寄A549细胞会有细胞脱落、坏死等现象，尽量选用干冰冷链快递。 希望这些小贴士能帮助你在细胞培养的路上越走越顺，如果还有其他问题，欢迎在评论区留言讨论哦！🧪🌈