AU565细胞系是在奥克兰海军生物科学实验室从一名乳腺癌患者的胸腔积液中提取的。该细胞系与SK-BR-3 (ATCC HTB-30)来自同一患者。 AU565细胞系扩增并过表达HER-2/neu癌基因；它表达 HER-3、HER-4 和 p53 癌基因。用霉酚酸 (MPA)、佛波醇 12-肉豆蔻酸酯 13-乙酸酯 (PMA)、视黄酸 (RA) 或针对 HER-2/neu 蛋白胞外结构域的 TA-1 单克隆抗体处理细胞可诱导细胞分化。用 Neu 分化因子 (NDF) 处理 AU565 细胞也会诱导成熟表型，其特征在于细胞的形态外观。未经处理的 AU565 细胞具有致密的细胞核和薄的细胞质，而处理的细胞则表现出与分化表型相关的形态，例如被相当大的细胞质包围的扁平大细胞核。1995 年 4 月提交给 ATCC 的培养物被发现受到支原体污染，通过 BM Cycline 治疗 21 天治愈了后代。治疗六周后，通过 Hoechst 染色、PCR 和标准培养测试对细胞进行支原体检测。所有测试均为阴性。该细胞可用作细胞生长模型来研究乳腺癌细胞的分化。 细胞传代小贴士： 胞脱落时的处理：当细胞开始脱落，我们需要将培养液转移到无菌离心管中，然后进行离心（125g，3~5分钟）1000-1200rmp，收集那些悬浮细胞。由于漂浮细胞较少，可能没有沉淀，大部分细胞会附着在管壁上。 去除培养基：轻柔地去除培养基，然后将贴壁细胞消化收集在一起，混匀后进行接种。 贴壁细胞处理：首先，用PBS洗1~2次，每次3-5ml。然后，添加1ml 0.25%的胰酶（含EDTA）到细胞瓶中，轻轻摇匀，让胰酶溶液铺满细胞表面，放入培养箱中。1-3分钟后取出到显微镜下观察，如果细胞无变化则继续放入培养箱消化。一旦细胞变圆、轻拍瓶尾部，大部分细胞开始脱落，当70-80%细胞漂浮脱落时，立 即加入5ml完全培养基（含10%FBS）中和。 细胞解离：用移液管轻轻吹打6-8次，使细胞充分解离。 细胞悬液处理：将细胞悬液转移到无菌离心管中，进行计数，然后离心收集细胞。用适量完全培养基重悬细胞沉淀，使细胞密度达到每毫升0.6-2x10^5。 接种新培养瓶：将细胞悬液转至培养瓶中，静置于培养箱中。建议T25培养瓶添加5-7ml完全培养基，之后2-3天进行换液。