AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是: 18β-甘草次酸通过靶向活化的造血干细胞中的PRDX1/2诱导ROS介导的凋亡来改善肝纤维化。

肝星状细胞(HSCs)是纤维形成的重要驱动因素。诱导活化的肝星状细胞凋亡是治疗肝纤维化的一种有前途的策略。18β-甘草次酸(18β-GA)是一种天然化合物，广泛存在于草药中，如甘草，用于治疗多种肝病，特别是在亚洲。在本研究中，我们证实了18β-GA通过诱导活化的造血干细胞的凋亡来减少肝纤维化。18β-GA抑制α-平滑肌肌动蛋白和I型α-1胶原蛋白的表达。利用基于活性的蛋白质图谱的化学蛋白质组学方法，结合细胞热位移试验和表面等离子体共振，我们发现18β-GA共价靶向过氧化物还蛋白1 (PRDX1)和过氧化物还蛋白2 (PRDX2)蛋白，通过与活性半胱氨酸残基结合，从而抑制其酶活性。18β-GA诱导活性氧(ROS)升高，导致活化的造血干细胞凋亡。PRDX1敲低也导致ROS介导的活化造血干细胞凋亡。我们的研究结果揭示了18β-GA在改善肝纤维化中的靶蛋白和分子机制，预示了18β-GA作为一种新型肝纤维化治疗药物的发展前景。

Acetylcysteine (NAC) (Abmole，M5385，纯度为100%)是ROS抑制剂，拮抗多种蛋白酶体抑制剂的活性。它还是肿瘤坏死因子TNF的抑制剂。

Fig. 5. 18β-GA inhibited antioxidant activities of target proteins.

检测PRDX1和PRDX2的表达水平。结果表明，18β-GA在BDL诱导的纤维化肝组织中不影响PRDX1和PRDX2的表达(图5A和B)，但18β-GA (80 mM)在激活的mHSCs中轻微下调PRDX1的表达，但不下调PRDX2的表达(图5C和C)。18β-GA (80 mM)在LX-2细胞中也轻微下调了PRDX2的表达，但没有下调PRDX1的表达，而18β-GA(20和40 mM)对其表达没有影响。PRDX1和PRDX2是非硒过氧化物酶家族的成员，具有相似的结构和功能。因此选择PRDX1进行后续实验。通过H2O2还原实验，18β-GA显著抑制重组人PRDX1 (rhPRDX1)的酶活性(图5E)。此外，测定了ROS水平、细胞活力和凋亡。结果表明，18β-GA可提高LX-2细胞ROS水平，降低细胞活力，促进细胞凋亡。有趣的是，NAC (ROS清除剂)可缓解18β-GA诱导的ROS水平升高和细胞活力下降(图5F、e、H)，提示18β-GA诱导的ROS有助于诱导细胞凋亡。综上所述，这些结果表明18β-GA有效抑制了PRDX1诱导ROS介导的细胞凋亡的活性。

鸣谢：Qian Zhang, et al. J Pharm Anal. 2022 Aug;12(4):570-582.