【AbMole科研】Baicalein通过调节miR-206/RAP1B途径抑制PTC的细胞发育

AbMole生物 2020-12-11 12:04:42

AbMole精研抑制剂十年,最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是:Baicalein通过调节miR-206 / RAP1B途径抑制甲状腺乳头状癌的细胞发育

本研究为了探讨Baicalein对PTC细胞的体外治疗作用及其分子机制。将人PTC细胞TPC-1分为5组,并分别以10、20、50或100μM的蒸馏水或Baicalein处理。接着,合成miR-206,miR-206抑制剂,miR-206和miR-206抑制剂各自的阴性对照,RAP1B小干扰RNA(siRNA)和对照载体siRNA,并将其转染到TPC-1细胞中。使用3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基-2-H-溴化四唑(MTT)和Transwell测定法测量细胞活力,迁移和侵袭。通过定量实时逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹分别评估miR-206表达和Ras相关蛋白(RAP1B)水平。实验结果显示,Baicalein以浓度依赖性方式抑制TPC-1细胞的活力,迁移和侵袭,上调miR-206表达并降低RAP1B水平(p <0.01)。 miR-206负调控RAP1B表达,并增加Baicalein诱导的RAP1B表达降低。此外,RAP1B过表达缓解了由Baicalin引起的细胞活力,迁移和侵袭的抑制(p <0.01)。研究表明,Baicalein通过调节miR-206/RAP1B途径抑制PTC细胞的生长,为PTC治疗提供了新的治疗策略。

Baicalin(AbMole,M3938,纯度 >98%)用于细胞培养,支持整个实验的进行。

Figure 1: Baicalein inhibits TPC-1 cell viability, migration and invasion.

Figure 2: Baicalein upregulates miR-206 expression and reduces RAP1B levels.

Figure 3: Baicalein reduces RAP1B level by regulating miR-206 expression.

Figure 4: Baicalein inhibits cell viability, migration, and invasion by reducing the RAP1B level.

图1结果,测量细胞生长以研究黄ical素在体外对PTC的治疗作用。 MTT分析表明,Baicalein以浓度依赖性方式降低了TPC-1细胞的细胞活力(图1 A;p <0.001)。Transwell分析表明,50μM黄ical素组的迁移或侵袭细胞数量少于0μM Baicalein组(图1 B;p <0.001)。这些数据说明Baicalein可以抑制PTC细胞的体外生长。

图2结果,qRT-PCR显示,Baicalein以浓度依赖的方式在TPC-1细胞中提高了miR-206的表达水平(图2 A;p <0.01)。相比之下,qRT-PCR和蛋白质印迹结果均表明,当细胞分别用10、20、50或100μM黄ical素处理时,RAP1B表达增加(分别为图2 B和C;p <0.01)。数据表明Baicalein上调miR-206表达并降低RAP1B水平。

图3结果,图3A中的结果表明,miR-206过表达下调RAP1B表达,而miR-206敲低上调RAP1B表达(p <0.01)。 此外,图3B中的蛋白质印迹数据显示,与Baicalein+ NC抑制剂组相比,Baicalein+ miR-206抑制剂组中RAP1B表达上调(p <0.01)。 这些结果表明Baicalein可以调节miR-206的表达,从而增加TPC-1细胞中RAP1B的表达水平。

图4结果,将RAP1B转染到TPC-1细胞中以评估RAP1B对PTC的作用。RAP1B已成功转染到用黄ical素处理的TPC-1细胞中(图4 A; p <0.01)。 此外,MTT分析表明,Baicalein+ RAP1B组的细胞活力高于Baicalein+载体组的细胞活力(图4 B;p <0.01)。同样,Transwell分析表明,在与Baicalein和RAP1B共同处理的TPC-1细胞中,细胞迁移或侵袭的抑制作用得到缓解(图4 C;p <0.01)。数据表明Baicalein通过调节RAP1B表达影响PTC细胞的活力,迁移和侵袭。

鸣谢:Peng Wang, et al. Tropical Journal of Pharmaceutical Research July 2020; 19 (7): 1383-1388

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