AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：AZD4547抑制成纤维细胞生长因子受体可保护脓毒症小鼠免受炎症。
脓毒症是一种危及生命的疾病，由宿主对感染的免疫反应失调引起，其特征是炎症因子的过度分泌。 AZD4547 是参与炎症反应的成纤维细胞生长因子受体的选择性抑制剂。本研究的目的是使用盲肠结扎和穿刺模型以及脂多糖刺激的 RAW264.7 巨噬细胞研究 AZD4547 在脓毒症中的炎症靶向作用和相关分子机制。 AZD4547 im 证明了 CLP 小鼠的存活，并在组织学上表现出强大的肺损伤保护功能。 AZD4547 预处理显着减轻了体内和体外促炎因子 IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP9 和 CXCL10 的表达。此外，AZD4547 抑制肺组织中巨噬细胞和 RAW264.7 巨噬细胞的增殖活性。此外，LPS 诱导的 RAW264.7 巨噬细胞中 NF κB/MAPK/STAT3 通路关键蛋白的磷酸化，如 p65、IκB-α、Erk1/2、JNK 和 STAT3 蛋白，可以被 AZD4547 预处理抑制。总之，AZD4547 对脓毒症小鼠的过度炎症损伤发挥保护作用，可能有潜力用作治疗脓毒症的有效药物。
AZD4547（Abmole，M1721，纯度99.83%）被用于体内外实验，贯穿于整个研究中。
Fig. 1. AZD4547 improves survival and alleviates systemic inflammation in septic mice.
CLP组96 h总生存率为8.3%（1/12），而CLP+AZD4547组为66.7%（8/12）。 Log-rank 分析表明，与 CLP 组相比，用 AZD4547 预处理的 CLP 小鼠的存活率显著提高。正如预期的那样，用 AZD4547 预处理显著降低了由 CLP 操作诱导的这些炎症因子的浓度。 我们的结果表明 AZD4547 保护脓毒症小鼠免受 CLP 诱导的全身炎症反应。
Fig. 2. AZD4547 alleviates acute lung injury and pulmonary inflammation in septic mice. Twenty-four-hour after operation, lung tissues were collected to assess the inflammatory response
正如预期的那样，未经处理的对照小鼠和 AZD4547 预处理的 CLP 小鼠均显示出比单独使用 CLP 的小鼠显着降低 IL-1β、IL-6、TNF-α、CXCL10 和 MMP9 的 mRNA 表达，以及 IL-1β、IL- 6、AZD4547预处理显着降低CLP操作诱导的MMP9。
Fig. 3. AZD4547 decrease the expression of MMP9 in lung tissue and the propagation of pulmonary macrophage in septic mice. Twenty-four-hour after operation, lung tissues were collected and subjected to immunofluorescent staining.
CLP操作导致巨噬细胞在肺组织中过度积累。 相比之下，在用 AZD4547 预处理的 CLP 小鼠的肺组织中仅检测到较少数量的 F4/80+ 和 Ki67+ 细胞 。
Fig. 4. AZD4547 inhibits RAW264.7 macrophages from secreting LPS-induced pro-inflammatory factors.
提取总mRNA和蛋白质以分析促炎因子的表达。 用 AZD4547 预处理显着降低了 LPS 刺激诱导的 IL-1β、IL-6、TNF-α、CXCL10 和 MMP9 的 mRNA 水平。 此外，与单独使用 LPS 组相比，在 AZD4547+LPS 组中观察到 IL-1β、TNF-α 和 MMP9 的蛋白质表达降低。
Fig. 5. Assessment of three potential signaling pathways that participate in the inflammatory response via Western blot
关于 NF-κB 通路，LPS 刺激组的磷酸化 p65 和 IκB-α 比对照组更丰富。更重要的是，参与 NF-κB 通路的两个关键蛋白的磷酸化被 AZD4547 预处理抑制。关于MAPK通路，用AZD4547预处理RAW264.7巨噬细胞显着降低LPS刺激诱导的Erk1/2和JNK的磷酸化水平，表明AZD4547抑制了MAPK信号通路的激活。 除了 NF-κB 和 MAPK 通路外，LPS 刺激还激活了 STAT3 通路，该通路被 AZD4547 预处理所抑制。这些结果表明 AZD4547 可能通过作用于 NF-κB、MAPK 和 STAT3 信号通路发挥抗炎作用。
鸣谢：Yueyue Huang, et al. Inflammation. 2019 Dec;42(6):1957-1967.
