【AbMole科研】miR-1301/TRIAP1轴参与表柔比星介导的骨肉瘤的抗增殖和促凋亡

AbMole生物 2021-01-04 11:07:26

AbMole精研抑制剂十年,最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是:miR-1301/TRIAP1轴参与表柔比星介导的骨肉瘤的抗增殖和促凋亡

表柔比星是治疗骨肉瘤最有效的药物之一。miR-1301参与骨肉瘤的发生发展,然而miR-1301是否导致骨肉瘤细胞对表柔比星的化学敏感性很大程度上仍然不甚明晰。

用不同浓度的表柔比星处理U2OS和SAOS-2细胞。分别利用流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞计数Kit-8法检测细胞增殖、Western blot和实时定量聚合酶链反应检测Bcl-2、Bax、cleaved-caspase-3、 PARP1、TRIAP1、miR-1301、PARP1、TRIAP1、miR-1301的表达。其中miR-1301和TRIAP1之间的关系是通过荧光素酶基因实验确定的。

结果表明,表柔比星呈剂量依赖性抑制骨肉瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡,降低Bcl-2表达,增加Bax、cleaved-caspase-3、PARP1表达。miR-1301在U2OS和SAOS-2细胞中下调。过表达miR-1301抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。表柔比星显著提高了miR-1301的水平,增强了上述效果。相反,miR-1301的缺失减弱了表柔比星介导的抗骨肉瘤作用。miR-1301负调控TRIAP1在U2OS和SAOS-2细胞中的表达。此外,表柔比星通过上调miR-1301水平抑制了TRIAP1的mRNA和蛋白水平。表柔比星通过下调TRIAP1抑制细胞增殖。

CCK-8试剂盒 (Abmole, M4839) 为MTT 法的替代方法,是一种基于WST(水溶性四唑盐,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

作者在研究过程中,测定了表柔比星对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。用不同浓度的表柔比星处理骨肉瘤U2OS和SAOS-2细胞株48 h后,采用细胞计数Kit-8检测细胞增殖情况。CCK-8即购自Abmole,在研究中发挥了重要的作用。

鸣谢:Yu L , Meng M , Bao Y , et al. miR-1301/TRIAP1 Axis Participates in Epirubicin-Mediated Anti-Proliferation and Pro-Apoptosis in Osteosarcoma[J]. Yons Medical Journal, 2019, 60(9).

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