AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：螺旋藻多糖的体内外免疫刺激作用及其对RAW246.7巨噬细胞的激活机制。

在这项研究中，通过超声微波辅助萃取(UMAE)获得了螺旋藻(S.p.)多糖(PSP)，并通过水两相系统(ATPS)进行纯化。由于PSP作为一个复杂的多组分系统，两种不同的方法分别应用于纯化的螺旋藻(S.p.)多糖(PSP)。PSP经二乙基氨基乙基(DEAE)-52纤维素层析分离得到三种不同酸性基团的多糖组分（PSP-1、PSP-2和PSP-3），以及两种多糖组分（PSP-L和PSP- h)通过超滤离心得到不同分子量的。研究了PSP在环磷酰胺(Cy)处理的小鼠中的化学保护作用。结果表明，PSP可显着增加脾脏和胸腺指数、外周血白细胞（PWBC）和外周血淋巴细胞（PBL）。体内免疫刺激试验表明，PSP可以剂量依赖性地增加血清中TNF-α、IL-10和IFN-γ的产生。体外免疫刺激试验表明，PSP及其组分（PSPs）能明显增强脾细胞和RAW 264.7细胞的增殖，增加一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素6的产生。(IL-6)。PSPs还可以增强RAW 264.7细胞的吞噬活性。小分子PSP-2、PSP-3和PSP-L的酸性多糖组分具有较高的免疫刺激活性。信号通路研究结果表明，PSP-L通过MAPKs激活RAW264.7细胞，通过TLR4受体激活NF-κB信号通路。

TAK-242（Abmole，M4838，纯度99.91%）是TLR4信号通路抑制剂，能通过结合TLR4胞内区域抑制脂多糖诱导的炎症介质的产生。在本研究中用于对细胞进行培养，浓度为10 µmol/L。

Figure 8. Effect of TLR4 inhibitor on PSP-L induced IL-6 production in RAW264.7

Figure 9. Effect of TLR4 inhibitor on PSP-L induced TNF-α production in RAW264.7

为了研究TLR4在PSP介导的巨噬细胞刺激中的作用，将TAK-242（TLR4抑制剂）与RAW264.7细胞预孵育1小时，然后与PSP-L或LPS孵育。测量了RAW264.7细胞中TNF-α和IL-6的产生。如图8和9所示，与仅用PSP-L治疗的组相比，IL-6和TNF-α的水平急剧下降（p < 0.01）。这一结果表明TLR4是RAW264.7细胞上PSP-L的受体之一，可能是重要的受体。

鸣谢：Xueyan Wu, et al. Mar Drugs. 2020 Oct 28;18(11):538.