Gut丨MED12缺失激活反转录转座子增强胰腺癌免疫治疗敏感性

建中康康 2024-09-06 21:18:52

胰腺导管腺癌(PDAC)是最致命的癌症之一,其特点是致死率高、治疗选择有限。免疫治疗,特别是免疫检查点阻断(ICB)疗法,在治疗黑色素瘤和非小细胞肺癌等癌症中已表现出显著疗效,但许多PDAC患者对ICB疗法的反应性差,这主要由肿瘤的低免疫原性和免疫抑制性肿瘤微环境(TME)导致。抑制表观遗传调节因子(如SETDB1、KDM5B和PHF8)可诱导反转录转座子(retrotransposons)介导的免疫反应,从而增强肿瘤对免疫治疗的敏感性,在肿瘤治疗中富有前景,但这在PDAC中尚不完全清楚。近日,一项发表于Gut的研究确定了MED12通过反转录转座子的表观遗传沉默在重塑免疫TME中的关键作用。

文章发表封图

为了确定调节免疫监视的因素,研究者在免疫健全或免疫缺陷小鼠的PDAC肿瘤模型中进行了体内CRISPR-Cas9表观遗传筛选。

01

体内CRISPR-Cas9筛选确定MED12为胰腺癌中TME的调节因子

研究者使用C57BL/6J小鼠的KPC1199 PDAC细胞系进行体内CRISPR-Cas9筛选,并转导了两个分别包含6030个针对1036个表观遗传因子的单链向导RNA(sgRNA)和120个对照sgRNA的文库。在免疫健全(C57BL/6J)和免疫缺陷(NSG)小鼠中进行筛选,确定MED12为PDAC中调节TME的关键因子。MED12缺失显著促进了免疫细胞,特别是CD8+T细胞、NK细胞和NK1.1+T细胞在肿瘤中的浸润和细胞毒性。

02

MED12缺失增强PDAC对ICB治疗的敏感性

研究者在KPC1199皮下和原位模型中评估MED12缺失对ICB治疗的影响。结果显示,MED12缺失的肿瘤对PD-1阻断治疗显示出更高的敏感性,表现为肿瘤体积显著缩小和生存期延长。

03

MED12缺失通过核酸感应途径诱导I型干扰素和NF-κB信号

研究者对MED12缺失和对照KPC1199细胞进行RNA测序和实时定量PCR分析。结果显示,MED12缺失激活了I型干扰素和NF-κB信号通路,增加了MHC I类分子的表达,促进了抗原处理和呈递。该效应通过内源性dsRNA触发的核酸感应途径介导。

04

MED12抑制H3K9me3标记的反转录转座子

研究者通过CUT&Tag分析和Western blot分析评估MED12对HP1A和H3K9me3标记的反转录转座子的影响。结果显示,MED12通过与HP1A相互作用稳定了HP1A,并帮助其锚定在H3K9me3修饰的异染色质上,从而抑制了反转录转座子的转录。MED12缺失导致HP1A下调和反转录转座子去抑制。

05

MED12缺失增加H3K27Ac沉积以增强反转录转座子激活和免疫反应

研究者采用BRD4抑制剂JQ1处理MED12缺失的KPC1199细胞,评估H3K27Ac水平的变化。结果显示,MED12缺失增加了H3K27Ac在反转录转座子和基因组启动子区域的沉积,促进了反转录转座子的转录和免疫反应。JQ1抑制了该效应,证实了H3K27Ac的作用。

06

MED12在人PDAC细胞系中的作用

研究者在多种人类PDAC细胞系(PANC-1、Mia Paca2、Patu8988T和AsPC1)中敲除了MED12。结果显示,MED12水平与免疫反应通路、反转录转座子水平以及接受ICB治疗的PDAC患者的预后呈负相关。MED12低表达的患者对ICB治疗的反应更好,生存期更长。

该研究强调了MED12通过反转录转座子的表观遗传沉默在重塑免疫TME中的关键作用,为增强肿瘤免疫原性和克服PDAC中的免疫治疗抵抗提供了潜在的治疗靶点。

参考文献:Tang Y, Tang S, Yang W, et al. MED12 loss activates endogenous retroelements to sensitise immunotherapy in pancreatic cancer. Gut. Published online August 31, 2024. doi:10.1136/gutjnl-2024-332350

0 阅读:5