怎样预防草鱼呼肠孤病毒病?鱼类呼肠孤病毒用什么药治疗效果好?

易运无 2024-11-06 10:14:31

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鱼类呼肠孤病毒病的症状表现和防治方法,怎样预防鱼类呼肠孤病毒病效果好?

一、鱼类呼肠孤病毒病的研究和分析

草鱼呼肠孤病毒(Grass Crap Reovirus,GCRV)是水生呼肠孤病毒属中毒力最强、我国淡水鱼养殖业危害最大的一种病毒。该病毒能引起草鱼发生出血病导致大量死亡而给我国的草鱼养殖业造成非常大的经济损失。

草鱼呼肠孤病毒病的病原学很复杂、毒株变异大、缺少针对性防控措施,这些都是导致该疫病持续流行的主要原因。

至今,已报道的分离株有30多株,各分离株在细胞培养特性、毒力、基因组带型、基因序列等各方面均存在较大的不同。

草鱼呼肠孤病毒是水生呼肠孤病毒属中致病力最强的毒株。该病毒可引起草鱼出血性疾病,因此早期被称为草鱼出血病病毒。CCRV不仅能感染草鱼,而且还能感染青鱼麦穗鱼、布氏整条鱼等。

并能使这几种鱼发生出血病症状而死亡。在我国淡水养殖业中曾有因感染GCRV而导致草鱼大批死亡的实例,对淡水养殖业造成了严重的危害,故探讨该病毒的特性及防治机制具有重要意义。

近年来人们通过对的结构、生理生化特性、分子生物学特征及其免疫原性等方面的研究,积累了一些资料,为在鱼类养殖过程中进行该病毒的免疫防治工作奠定了一定的基础,但仍有缺陷和不足,尚需进一步探索。

2012年8月,广州白云区某草鱼养殖场疑似发生出草鱼出血病疫情,患病草鱼主要临床症状为肠道出血严重。

肠炎症状明显,鳃充血呈红色,其它部位症状不明显。采集病鱼的肠道、肝脏、脾脏和肾脏组织,剪碎研磨制备组织匀浆液接种草鱼吻端成纤维细胞(Proboscis Snout into Fibers,PSF)细胞进行病毒分离。

盲传至第二代开始出现致细胞病变效应(Cytopathic effect,CPE)。用感染病毒的PSF细胞制备电镜负染切片,电镜下观察到呈六边形,无囊膜,大小约70nm呈晶格状排列的病毒粒子。

同时通过采用三重RT-PCR检测方法对采集的组织和解毒后的PSF细胞培养液进行病毒检测,在肠、肝、脾、肾脏及细胞培养液中均扩增出约500bp左右的单一条带,组织中以肠道的条带最明显。

测序结果进行BLAST比对,结果显示,与GCRV 873株和GSRV的核苷酸序列相似性分别为93%和92%。

将PSF细胞增殖后的病毒液超速离心进行浓缩,提取浓缩后的GCRV基因组,进行SDS-PAGE电泳带型分析,结果发现,新分离毒株11个条带,和I型的873毒株的带型比较接近,只是3个大片段存在差异。

结合临床症状、细胞感染实验、电镜观察、RT-PCR检测结果、基因序列同源性、全基因组SDS-PAGE电泳带型,初步鉴定分离到的毒株为一株新的草鱼呼肠孤病毒,暂时把它命名为GCRV GZ1208。

将Z1208种毒接种PSF细胞,采用TCID50测定方法来测定该分离株接种PSF细胞后的病毒滴度,结果为10-8.5/0.1mL。

二、鱼类呼肠孤病毒的感染特性及病理

呼肠孤病毒主要经鱼鳃进人鱼体,4d后发病,5-7d后鱼体出现明显的出血症状,鱼群进入死亡高峰期。不同的呼长孤病毒毒株具有不同的细胞嗜染性,各毒株感染草鱼后所出现的病症也不相同。

通过对人工感染呼长孤病毒后的电镜观察,在草鱼肾脏组织细胞内有大小约为50nm的病毒,散布于细胞质内,而在肠组织细胞内观察到大小为70-78nm的病毒粒子,形态与离心提纯的病毒粒子相一致。

由此推测,无外衣壳的未成熟病毒存在于肾脏,成熟的病毒粒子存在于肠道内,肾脏应该是呼长孤病毒复制扩增的场所在各脏器的血管和微血管内皮细胞中也可观察到病毒的存在。

过去认为呼长孤病毒所引起鱼体患病的主要病理变化是病毒能破坏所感染鱼的循环系统,使血管扩张,导致凝血作用减弱,造成血清乳酸脱氢酶同工酶的相对活性系乱,引起鱼体生理功能失调进一步引发各器官的病变和功能的丧失。

但现在的研究表明,呼肠孤病毒对鱼体的危害是以损害血管壁造成出血和失血为主,引起循环和代谢障碍。

进一步引起了其他细胞的病变,最终导致器官功能的丧失;病毒对肾脏和肠道的直接作用进一步加剧了对循环系统破坏。

病毒对部分脏器和免疫系统的破坏并不是因为病毒的直接作用,而是因病毒感染后细胞产生一些可溶性因子及血管损伤。

三、草鱼呼肠孤病毒导致出血病暴发

草鱼出血病病原体是草鱼出血病病毒(Grasscarphemorrhagevirus,GCHV),为水生呼肠孤病毒,隶属呼肠孤病毒科水生动物呼肠孤病毒属,因此又称草鱼呼肠孤病毒。

患病初期草鱼会有不同程度的食欲缺乏、头部发黑,或者草鱼背部出现浅白色条带。随着病情的加重,患病草鱼各器官、组织会出现不同程度的充血、出血现象,出血的部位包括头部、口腔、上下颌、鳃盖以及腹部等。

剥除鱼的皮肤,可见肌肉呈点状或块状充血、出血,严重时全身肌肉呈鲜红色,肠壁充血,肠系膜也有出血点或血丝等。鱼体由于严重出血,导致贫血,此时鳃丝通常呈灰白色。出血严重时,病鱼因贫血而使血液颜色变淡,血量明显不足。

一是红肌肉型,病鱼体表无明显的出血症状或仅表现轻微点状出血,但肌肉明显充血,肌肉呈点状或斑块状出血。

严重时往往全身肌肉均呈鲜红色,同时鳃丝、鳃瓣失血严重,鳃丝呈灰白色,出现白鳃现象,有时有腹水,肠道无食物。

二是红鳍红鳃盖型,这种类型的症状一般以体表出血为主,病鱼的鳃盖、鳍基、头顶、口腔、上下颌以及眼眶等处有明显的充血、出血现象,有时鳞片下也有充血或块状出血现象,但肌肉充血不明显或局部点状出血。

三是肠炎型,病鱼体表及肌肉的充血现象均不太明显,以肠道充血、出血为主,病鱼的肠道全部或部分呈鲜红色。

四、鱼类呼肠孤病毒病怎么防治用药?

可以用佰利安+肠痢健(五黄粉)的中药复方组合。能够有效杀菌、抗病毒,预防水产常见的病毒性、细菌性疾病。

(1)佰利安:为纯植物提取物(黄芪,金银花,杨树花)组成的,不仅能够减少水中及机体的致病弧菌、假单胞菌、爱德华氏菌,而且可提高水产动物机体的免疫力,而且植物提取物使用完无需解毒,没有任何药残。

主要用于处理鱼、虾蟹、海参、贝类、甲鱼等各种水产动物由病毒、细菌、霉菌、原生虫等引起的感染性疾病。

用法用量:外用:150 - 200毫升/亩·米水深:症状明显时用200 - 250毫升/亩·米水深。拌料:用4 - 5毫升/千克饲料。

(2)肠痢健(五黄粉):为黄芪等植物微粉,调节机体免疫功能而发挥扶正祛邪,抑菌灭菌的作用;

可特异性的排除侵入机体的异物,对特异性免疫和非特异性免疫均有促进作用,从而提高机体的抗病能力;健胃消食,泻热通肠,凉血解毒的作用,具有保肝、护胆的生物调节作用,增强体质,提高应激能力;

改善水体水质,保肝护胆。对水体以及水产动物(鳃、体表等)组织致病菌有强大的抑菌、灭菌、抗病毒作用。

每月3次(按5%投饵量计,每100kg饲料用本品500g)。每日1次,全池泼洒:按每1m3水体1-2g的量。

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