AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：芦荟水提物及其两种活性成分对结直肠癌细胞Wnt/β-catenin和Notch信号通路的研究。

芦荟是《中华人民共和国药典》（2015年版）中记载的常用中药。它传统上用于治疗便秘。芦荟的安全性评估需要引起很多关注，因为一些研究报告了口服芦荟与CRC的发展之间的关联。然而，物质基础和分子机制仍不清楚。尽管已知 Wnt/β-catenin 和 Notch 信号通路与 CRC 的发生和发展密切相关，但芦荟对这些癌变通路的影响尚未完全确定。因此，本研究旨在研究芦荟对 Wnt/β-catenin 和 Notch 信号通路的影响，以及 CRC 细胞的增殖。

首先，通过荧光素酶报告基因、RT-qPCR、蛋白质印迹和免疫荧光分析，分别研究了芦荟水提物及其两种活性成分（芦荟素和芦荟素）对Wnt β-catenin和Notch信号通路的影响。 .此外，然后进行 RNA 测序分析 (RNA seq) 以验证它们对 Wnt 相关和 Notch 相关基因表达的调控活动。最后，还通过 MTT 测定和细胞周期分析评估了它们对 RKO 细胞增殖和细胞周期阶段的影响。结果表明，只有在 Wnt3a 存在的情况下，芦荟水提取物及其活性成分芦荟才能激活 Wnt/β-catenin 通路并抑制 Notch 信号通路。而芦荟素的特征是直接激活 Wnt/β-catenin 通路并抑制 Notch 通路，而与 Wnt3a 无关。在 24 小时内，芦荟提取物及其两种成分均未能影响 RKO 细胞的增殖或细胞周期阶段。然而，在Wnt3a的存在下，浓度为33.3 μg/ml的芦荟水提物在培养48小时后开始促进RKO细胞的细胞增殖。总之，本研究表明，芦荟提取物及其活性成分芦荟苷在 Wnt3a 存在下激活 Wnt/β-catenin 通路并抑制 Notch 通路。而另一种活性成分芦荟素则依赖 Wnt3a 激活 Wnt/β-catenin 通路并抑制 Notch 信号通路。鉴于 Wnt/β-catenin 和 Notch 通路与 CRC 的进展密切相关，这些发现将有助于更好地了解芦荟的结肠致癌性。

DAPT（Abmole，M1746，纯度98.36%）一种 γ-分泌酶抑制剂，可以阻断 Notch 信号的传递。在本研究中用其来降低 Notch 通路靶基因在 RKO 细胞中的表达。

Fig. 8. The connection between the Wnt/β-catenin and Notch regulation activities of Aloe vera and its two components on NIH/3T3 cells (A) and RKO cells (B) were examined by using DAPT (5 μM, in DMSO),DMSO (0.1%) was added in control group.

单独的 DAPT 处理不能增加活性 β-连环蛋白的蛋白质水平，而 DAPT + 水提取物或 DAPT + 芦荟苷给药能够在 Wnt3a 配体存在的情况下增加它。在没有 Wnt3a 配体的情况下，DAPT 以及与芦荟素的组合仍然不会干扰 β-catenin 蛋白水平。 这意味着 Notch 抑制不影响 β-catenin 蛋白水平，芦荟、芦荟素和芦荟素水提物诱导的 Wnt/β-catenin 活化不是由于它们的 Notch 抑制活性。

鸣谢：Chang Peng, et al. J Ethnopharmacol. 2019 Oct 28;243:112092.