【AbMole科研】贾第鞭毛虫通过活性氧介导的线粒体途径体外诱导小肠上皮细胞凋亡

AbMole生物 2020-12-22 14:16:44

AbMole精研抑制剂十年,最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是:贾第鞭毛虫通过活性氧介导的线粒体途径体外诱导小肠上皮细胞凋亡。

肠道原生动物寄生虫,贾第鞭毛虫(Giardia duodenalis)每年感染世界上许多人。贾第鞭毛虫感染被认为对肠道上皮细胞生长有负面影响,而其潜在机制尚待探索。这项研究通过荧光显微镜,透射电子显微镜,流式细胞仪,蛋白质印迹和细胞计数kit-8分析评估了贾第鞭毛虫滋养体刺激的Caco-2细胞中活性氧(ROS)的产生和凋亡事件。结果表明,贾第鞭毛虫滋养体处理可诱导乳酸脱氢酶释放和Caco-2细胞凋亡。治疗后ROS水平升高。观察到的线粒体损伤的典型特征包括基质和cr的明显肿胀和变性。滋养体处理后,Bax蛋白表达水平升高,而Bcl-2蛋白降低。滋养体刺激还导致线粒体膜电位降低以及细胞色素c从线粒体释放到细胞质,该过程伴随caspase-9和caspase-3的活化以及多聚(ADP-核糖)聚合酶1的裂解。用ROS抑制剂N-乙酰基-L-半胱氨酸预处理可以逆转十二指肠杆菌诱导的Caco-2细胞凋亡。两者合计,表明十二指肠可以通过ROS和线粒体介导的caspase依赖性途径诱导Caco-2细胞凋亡。这项研究使我们进一步了解了贾第鞭毛虫滋养体与宿主细胞之间相互作用的细胞机制。

ROS抑制剂N-acetyl-l-cysteine (Abmole, M5385,纯度 99.16%) , 可拮抗多种蛋白酶体抑制剂的活性,在本研究中用于细胞活力测定。

Figure 5. The role of ROS production in regulation of Caco-2 cell apoptosis induced by Giardia trophozoites.

我们使用NAC抑制ROS生成来分析ROS在调节滋养体诱导的细胞凋亡中的作用。在暴露于滋养体之前,将Caco-2细胞与NAC一起预孵育3小时可以阻止Cyt-c的释放。NAC减少了滋养体处理过的细胞中CASP3的活化(P<0.01)。

鸣谢:Lin Liu,et al. Pathogens. 2020 Aug 23;9(9):693.

0 阅读:4