AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：TNBC新辅助化疗中循环非编码 RNA 生物标志物的潜力。

由于新辅助化疗 (NACT) 与三阴性乳腺癌 (TNBC) 患者有希望的早期反应率之间存在正相关，包括病理完全反应的概率，NACT 越来越多地用于 TNBC 管理。对 NACT 早期反应具有诊断能力的基于液体活检的生物标志物可能支持已建立的监测工具，这些工具在一定程度上不精确且成本高昂。对非编码 RNA (ncRNA) 表达进行简单的基于血清或尿液的分析可以实现快速、微创测试和及时调整治疗方案。本研究调查了乳腺癌相关的 ncRNA [microRNA (miR)-7、-9、-15a、-17、-18a、-19b、-21、-30b、-222 和 -320c，PIWI-interacting RNA-36743和 GlyCCC2] 在三阳性 BT-474 细胞和三种 TNBC 细胞系（BT-20、HS-578T 和 MDA-MB-231）中使用逆转录定量 PCR 进行各种化疗剂处理。使用多变量统计回归分析分析细胞内和分泌的微泡ncRNA表达水平。通过分析 mRNA 和蛋白质水平的细胞周期决定因素来研究化疗驱动的效果。使用两样本 t 检验将来自 8 名 TNBC 患者的血清和尿液样本与 10 名健康女性进行比较。在两个时间点比较来自 TNBC 患者的样本。化疗治疗在 TNBC 细胞系和细胞内和细胞外隔室中的 BT-474 细胞系中诱导 ncRNA 表达的明显变化。基于血清和尿液的 ncRNA 表达分析能够区分 TNBC 患者和对照组。TNBC 患者尿液样本中的时间点比较显示 ncRNA 水平普遍上升。血清数据表明 piR-36743、miR-17、-19b 和 -30b 表达水平与 NACT 驱动的完全临床反应之间存在潜在关联。本研究强调了 ncRNA 作为基于液体活检的生物标志物在 TNBC 化疗治疗中的潜力。本研究中测试的 ncRNA 之前已经研究过它们参与 BC 或 TNBC 化疗反应。然而，这些先前的研究仅限于患者组织或体外模型。本研究的数据提供了对 TNBC 患者液体样本中 ncRNA 表达的新见解，该研究是评估 ncRNA 作为监测 TNBC 治疗的诊断生物标志物的第一步。

Carboplatin（Abmole，M2288，纯度>98%）是一种DNA合成抑制剂，结合到DNA上，干扰细胞修复机制，在本研究中用于处理乳腺癌细胞，浓度2.0 µg/ml。Gemcitabine（Abmole，M5680，纯度99.95%）是一种DNA合成抑制剂，制 DNA 合成和修复，导致细胞自噬和凋亡，在本研究中用于处理乳腺癌细胞，浓度40.0 µg/ml。

Figure 4. Influence of chemotherapy treatment on cell cycle determinants in (triple negative) breast cancer cell lines.

结果显示，用多柔比星和吉西他滨处理后，Cyclin D1 mRNA 表达水平降低（图 4A）。多变量分析表明 BT-474 和 HS-578T 细胞（多柔比星，分别为 P<0.001 和 P=0.010）以及 BT-474、HS 578T 和 MDA-MB-231 细胞中的 cyclin D1 表达水平降低 （吉西他滨，分别为 P = 0.002， P <0.001 和 P = 0.016）与截距比较。在紫杉醇处理的 HS-578T 细胞中也观察到减少(P=0.007)。 在这种情况下，卡铂不影响细胞周期蛋白 D1 mRNA 的表达。化疗后 TOP2α mRNA 水平降低，除了进行卡铂治疗后的细胞系（图 4B）。

Figure 6. Chemotherapy treatment influences DDX5 and ‑17 protein levels in (triple negative) breast cancer cells.

结果表明，与 mRNA 调节相比，蛋白质印迹显示多柔比星处理后 DDX5 调节在蛋白质水平上存在差异；DDX5 在蛋白质水平上被下调。吉西他滨治疗后，BT-474 和 HS-578T 细胞中的 DDX5 蛋白水平也下降，而紫杉醇治疗后 MDA-MB-231 细胞中的 DDX5 蛋白水平下降。 多柔比星引起的 DDX17 蛋白水平降低与 DDX17 mRNA 降低一致。 在 BT-474 和 BT-20 细胞中，吉西他滨导致 DDX17 蛋白表达降低；紫杉醇在 MDA-MB-231 细胞中具有相同的作用（图 6B 和 C）。

鸣谢：Andrea Ritter, et al. Int J Oncol. 2020 Jan;56(1):47-68.