CCK-8实验结果异常？一文教你见招拆招😉
聚焦细胞检测
2024-11-04 08:19:40
增强型细胞活力检测试剂盒(CCK-8)是一种基于WST-8的快速、高灵敏度、非放射性比色检测试剂盒，广泛用于细胞增殖实验或细胞毒性实验。其基本原理为：试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比，通过检测在450 nm处的吸光度，可以间接计算活细胞的量。
透过现象看本质，从实验原理我们可以了解到，CCK-8检测结果最终反映为OD值。然而，除了实验本身，其他因素引起的颜色变化也可能影响OD值的读数；同时，CCK-8实验主要评估样本中的脱氢酶总活性，任何影响脱氢酶活性的因素都可能导致OD值的波动。因此，CCK-8检测在操作不当的情况下容易产生异常结果。接下来，我们将探讨在CCK-8实验中可能遇到的异常情况，并提供相应的解决策略。
一、【 复孔差异大 】
1️⃣接种不均匀
2️⃣暴力加药
3️⃣液体蒸发
4️⃣检测前未混匀
二、【组间差异小】
1️⃣细胞接种密度过大
2️⃣药物的影响
3️⃣孵育时间过长
三、【趋势对不上】
希望今天的分享能帮助大家在CCK-8实验中游刃有余。精准的实验操作是获得可靠数据的关键，如果你有更多问题或想分享经验，欢迎在评论区留言！
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