T细胞分选揭秘：荧光激活与磁激活细胞分选

在免疫学的世界中，T细胞扮演着关键角色，它们通过多样的亚群和功能，守护着我们的健康。精确研究T细胞，需要依赖精细的分选技术，荧光激活细胞分选与磁激活细胞分选为科研人员提供了强大的工具。今天小E将和大家一起探讨这两种技术在T细胞分选中的应用。 🎶【T细胞简介】 T细胞是一类包含多种细胞亚群、具有多种生物学功能的淋巴细胞。 🎶【常见的细胞分选方法】 细胞分选技术是指从异质细胞混合物中（常见为组织细胞悬液、血液样本等）分选特定的一种或多种目的细胞的技术。常见细胞分选技术主要可分为两类：基于细胞物理性质的分选技术、基于生化亲合力的分选技术。 ·基于细胞物理性质的分选技术包括密度梯度离心、沉降法、粘附法等。 基于生化亲合力的分选技术包括荧光激活细胞分选（流式分选，FACS)和磁激活细胞分选（磁珠分选，MACS）。 🎶【荧光激活细胞分选】 荧光激活细胞分选是在流式细胞术基础上发展而来的。实验开始前，需制备单细胞悬液，并通过荧光探针标记（流式抗体标记）细胞。使用分选型流式细胞仪（如BD Aria Ⅲ）对样本进行分析与分选。包裹有目的细胞的液滴将被带上正电荷或负电荷，通过带有高压的偏转板时，在高压电场的作用下将发生不同的偏转，落入各自的收集容器中；而包裹非目的细胞的液滴没有电荷标记，落入中间的废液收集器，从而实现目的细胞与非目的细胞的分离。 🎶【磁激活细胞分选】 磁激活细胞分选利用抗体或配体以及磁性微球（磁珠）标记细胞。当标记后样本置于磁场中时，磁珠因磁力作用携带标记细胞沉淀在磁极处，而未标记细胞停留在上清中，从而实现标记细胞与未标记细胞的分离。 🎶【联合使用荧光激活细胞分选和磁激活细胞分选分离T细胞】 荧光激活细胞分选和磁激活细胞分选的优缺点在很大程度上是互补的，当单一分选方法无法满足实验所需时，可联合使用两者。比如需要分选γδ Τ细胞中的某一或某几个细胞亚群时，由于γδ Τ细胞占比较低，单纯使用荧光激活细胞分选，实验耗时长。而使用磁激活细胞分选可能由于细胞细分程度高，无法使用合适的分选标志物进行区分。此时可首先使用γδ Τ细胞磁性分选试剂盒对样本中的γδ Τ细胞进行富集，随后对富集细胞进行荧光激活细胞分选。这样既可减少实验时长，也可得到高纯度的目的细胞。