数据对不上?细胞周期&CCK-8结果关联性分析

聚焦细胞检测 2024-08-29 23:24:29
CCK-8、周期、凋亡、Elisa……实验做了一大堆,结果一分析,数据全都对不上 [失望R] · 处理后CCK-8检测显示,明显有抑制增殖的效果 · 但是凋亡检测发现,处理后凋亡率反而下降了 · 周期检测中各组更是没有任何变化 感觉整个人都emo了! 大家先别着急,真相往往隐藏在这看似“冲突”的实验结果中,也许你的结果没有任何问题。 今天我们来看下【 CCK-8与细胞周期结果之间的关系 】。要分析这两个实验结果的关系,我们首先得准确知道每个实验结果的真实含义。 有小伙伴可能就会说了,这还不简单嘛,CCK-8表示细胞增殖速度,细胞周期检测结果表示细胞周期中各时期的比例。对此,小E老师只能说:对了,但不完全对。 👉准确来说,CCK-8检测的是样本中脱氢酶总活力,细胞周期检测的是每个细胞的核酸含量。(P2) 只有从这个层面去看待我们的实验结果,才能找到问题的根本。 通过CCK-8检测到OD值发生了变化,可能的原因有很多(P3) 同样地,细胞周期检测出现异常,也可以从实验原理中找到合理的解释。核酸所指的除了细胞核中的DNA外,还包含RNA等多种物质,这些物质都可以与PI结合,从而影响结果分析。 更多细胞周期检测异常情况分析及解决方案的相关知识,请看上期细胞周期检测三大常见问题及解决方案。 在分析CCK-8与周期关系之前,我们首先需要排除异常原因带来的结果变化。如: 1样本中含有氧化还原剂/金属离子/有色药物等,在进行CCK-8检测前,应先进行换液; 2在进行细胞周期检测时,应注意控制细胞接种密度,培养时细胞密度不可过大,避免细胞间产生接触抑制,从而大量停留在G0期; 3在进行细胞周期检测时,需添加RNase,避免RNA对结果造成的影响。 完成以上工作后,我们就来看看CCK-8与细胞周期之间存在的变化关系,及其可能的原因(P4)

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