1926年，周西成掌握贵州军政大权后，提拔妹夫毛光翔为副军长。师长王家烈非常不满，和毛光翔斗殴，结果被撤职查办。不久后，周西成念王家烈多年追随自己鞍前马后，就又恢复了师长职务。 屡立战功的王家烈在师长的位置上踏步，这让他对周西成产生不满，对毛光翔更是视若仇敌。 1928年冬，原黔军师长李燊，在何应钦的支持下，获取了一批军械后招兵买马，率部进入贵州，试图击败周西成控制贵州。 周西成委王家烈为前敌总指挥，率部与李燊激战于秀山、铜仁、松桃等地。李燊不支，求助于云南的龙云。 龙云派滇军入黔，支援李燊作战。双方混战一直持续到第二年五月，伤亡都很严重，周西成在黄柟桠指挥部队时，遭遇李燊部偷袭中弹身亡，王家烈也身受重伤。 周西成死后，副军长毛光翔被南京任命为贵州省主席兼二十五军军长，王家烈升任副军长。 王家烈不满屈居于毛光翔之下，任副军长后，积极扩充实力。在张发奎、李宗仁联合反对蒋介石后，蒋介石委任王家烈为贵州这一路的讨逆军指挥官，并将军政部的电台拨给他使用。 王家烈率部于黔桂边境，牵制李宗仁、白崇禧后方。之后，王家烈又逼走四川军阀赖心辉，占据黔东一带。 毛光翔见王家烈的势力不断扩充，决定夺取其兵权，他诡称滇龙云再次派滇军袭黔，急电王家烈马上到贵阳，指挥黔军作战。 王家烈认为其中有诈，不仅拒绝了毛光翔的要求，反而率部进而占据了铜仁、松桃以及黔东北一带，扩大了地盘。 蒋介石这时开始扶持王家烈，以取代毛光翔。1931年11月，国民党在南京召开大会，蒋介石直接提名王家烈为第二十五军代表出席会议，这让兼任二十五军长的毛光翔非常不满。 王家烈被蒋介石拉拢了以后，与毛光翔之间的矛盾，日愈加深。此时，正遇湘西发生兵变，王家烈带领自己直接掌握的何知重第一师所属各团兵马，进驻湘西洪江，兼任湘黔边区司令。 洪江原本是贵州鸦片出口必经要道，国民政府在此专收贵州的烟土过道税，收入颇丰。王家烈把这笔收入拿来作为自己的军饷。 何知重是王家烈的姨母兄弟，为了帮他扩充实力，便策划买枪买弹，招兵买马。蒋介石得悉这一情况后，便召王家烈到南京，予以热情接待，慰勉有加，并拨给王部新式步枪一千支。 王家烈在蒋介石的支持下，积极扩充部队，新增加九个团，并进行了装备更新，还创办沅洲军事教导队。 经过一段时间的发展，王家烈认为自己羽翼已丰，便公开与毛光翔决裂，决心夺取贵州军政大权。 1932年，王家烈在蒋介石的默认下，在洪江誓师后，亲率特务团和第一、二、四团，由洪江直趋贵阳。 王家烈将特务团派驻独山，防守并负责堵击毛光翔控制的滇军，其余三团兵马，分驻贵阳城郊，对贵阳形成包围之势，胁迫毛光翔交印让权。 当时，毛光翔的手下大都主张对王家烈开战。但周西成的姑母，毛光翔的母亲力阻，她对儿子毛光翔说：“这支军队是大家创建的，王家烈是出了大力的。以前周西成曾说过，他之后，按群、绍、佩、用的次序继承下去。继武干了三年，你也干了三年，现在应该让王绍武来干了。你们决不能为了争权而打仗，伤害百姓，自毁继武和你的功德。” 毛光翔考虑再三后，决定将权交给了王家烈。蒋介石任命王家烈为贵州省主席兼二十五军军长。 毛光翔交出贵州的军政大权，是在王家烈包围贵州的前提下，再加上母亲劝说，被迫同意的。交权后不久，毛光翔在遵义与黔军将领尤国才、蒋在珍、宋醒等人，暗中密谋反对王家烈。他们将部队在黔西鸭池河会合后，然后集中兵力进攻贵阳。 王家烈在贵阳只有四个团，他以三个团对付蒋在珍，一个团对付宋醒，双方在鸭池河展开激战。宋醒战败，溃退至毕节被彻底消灭。蒋在珍部也不能阻挡王家烈部的攻势，节节败退。王家烈率部追到遵义城下，正准备攻城时，王家烈的副军长尤国才乘虚袭击贵阳，这完全出乎王家烈的意外。 原来，王家烈与尤国才私交很好，王家烈没有想到尤国才会反对他，直到前两天，王家烈还接济尤国才三万元。因此，王家烈对尤国才毫无防备。 王家烈无力应战，只好撤出留守贵阳的部队，到榕江集中，并令何知重率部从洪江赶来增援。何知重和王家烈会合后，合兵反攻又夺回贵阳城，击败了尤国才。 王家烈虽然重新夺回贵阳，但当时贵州的倒王联盟，对王家烈并未臣服，原属毛光翔的几个师长，仍各霸一方，各自为政。尤国才割据盘江八属，侯之担割据赤水、仁怀、习水、绥阳等县，蒋在珍割据正安沿河各县，他们对王家烈虽然口头上表示服从，但王家烈并不能直接调动他们的兵马。 有贵州省主席头衔的王家烈，实际所能控制的也只有黔南十几个县和黔东几个县。在掌握了贵州大权后，王家烈一改往日较为简朴的作风，开始沉尽情享受。 王家烈的妻子万淑芬野心很大，趁机干预军政，往返于南京、两广之间，到处活动，大量安排万氏家族和同乡，形成铜仁系。 就这样，贵州的桐梓派和铜仁派之间，相互争权夺利，斗争十分激烈。对此，王家烈不闻不问，俨然毫无存在的傀儡。
