盘点常用细胞增殖检测方法(建议收藏)

聚焦细胞检测 2024-08-13 12:19:11
近年来,细胞增殖一直是生物学领域的研究热点。它不仅关系到生物体的正常生长发育,也是许多病理过程,如癌症发生和治疗响应的基础。了解细胞如何增殖,以及如何准确检测细胞增殖,对于科学研究和临床应用都具有重大意义。今天小E老师将详细介绍细胞增殖的基本概念、常用检测方法以及这些方法的优势与局限,希望大家能有所收获。 一、细胞增殖及细胞增殖检测的意义 细胞增殖是指细胞在周期调控因子的作用下,通过DNA复制、RNA转录和蛋白质合成等复杂反应而进行分裂的过程。细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础,是生物体的重要生命特征。 二、常用细胞增殖检测方法 1.检测细胞DNA合成 通过直接测定细胞的DNA合成含量来评价细胞的增殖能力,是检测细胞增殖最准确的方法。细胞在增殖过程中,DNA的倍增,是最显著的变化之一,通过检测DNA量的变化,可判断细胞数量的变化。 ①3H-TdR ②BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷) ③EdU P4:EdU试剂盒检测原理 2.活细胞荧光标记 ①CFSE P6:体外诱导培养的小鼠骨髓来源树突状细胞使用LPS促成熟后和正常小鼠脾脏(使用CFSE (E-CK-A345)染色)进行共培养72 h,再使用Elab Fluor Red 780 Anti-Mouse CD8a (E-AB-F1104S)和APC Anti-Mouse CD4(E-AB-F1097E)共染,并使用流式细胞仪检测T细胞的增殖情况 3.检测细胞代谢活性 ①MTT ②CCK-8 4.检测细胞增殖相关抗原 有些抗原只存在于增殖细胞中,而非增殖细胞缺乏这些抗原,因此常作为细胞增殖的标志。可通过WB、IHC、IF等方法检测增殖细胞特异性表达的某些特定蛋白,如增殖细胞核抗原PCNA,细胞核相关抗原Ki-67和微小染色体维持蛋白MCM等,进而反映细胞增殖的情况。 三、常用检测方法对比

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