Caspases是一类在细胞凋亡过程中起关键作用的蛋白酶，它们通过特异性地切割靶蛋白来执行细胞程序性死亡。Caspases酶活性的检测对于研究细胞凋亡机制、药物筛选以及疾病诊断等方面都非常重要。以下是一些常见的Caspases酶活性检测问题分析及解决方案。 我们先来简单回顾下Caspases蛋白酶家族参与的细胞凋亡和焦亡的相关内容（P2） 接下来，我们来了解下Caspases蛋白酶家族的成员，Caspases即半胱氨酸蛋白酶家族作为程序性细胞死亡信号通路的关键调控环节，发挥着举足轻重的作用。 细胞凋亡的过程实际上是Caspase被活化并发挥凋亡蛋白酶的酶切功能的级联反应。Caspases蛋白酶家族存在于胞浆中，它们同源性很高，结构相似，均含有一个半胱氨酸激活位点，特异地断开天冬氨酸残基后的肽键，目前被发现的Caspases有14种，哺乳动物Caspases蛋白酶家族根据结构和功能，可以分为三大类（P3） Caspases酶在细胞中常常以酶原的形式存在，不具有剪切活性，被激活后以剪切体的形式存在。本文着重介绍使用酶标仪通过Caspases酶活性检测试剂盒（分光光度法）检测Caspases活性体的方法，其原理主要是基于Caspases可以催化特异性底物Ac-XXXD-pNA产生黄色的pNA (p-nitroaniline)， pNA在405 nm附近有强吸收，从而可以通过测定吸光度来检测Caspases的活性。（P4） Caspase酶活性检测试剂盒（吸光法）的检测流程主要包括样本的前处理、样本的裂解、酶活的检测三大块，针对该检测流程，汇总了以下常见问题和解决方法（P5678） 1️⃣样本前处理过程中存在的问题和解决办法 2️⃣样本裂解过程中存在的问题和解决办法 3️⃣样本检测过程中存在的问题和解决办法 4️⃣其他因素引起的问题和解决办法 综上所述，细节决定成败，把各个实验环节的细节把控到位，Caspases酶活性检测（吸光法）就可以万无一失，获得最准确的实验数据。