MDCK(NBL-2)含血清培养VS无血清培养
新舟生物
2024-09-27 13:10:36
含血清培养的操作和无血清培养操作大不相同呦[抓狂R]
很多小伙伴都会含血清的操作，今天小编分享给大家[五R]无血清培养的传代操作，一起看看吧[黄金薯R]
🌟 无血清培养：优选试剂搭配指南
产品货号与名称：
CSP140: Accutase
CSP042: 无血清细胞冻存液
CSP015: 细胞解离液
🔬 培养小贴士 & 关键点：
传代必备：使用特制细胞解离试剂，确保细胞完整性。
推荐传代比例：1:2至1:3，保持细胞活力。
接种密度：每平方厘米1 x 10^5活性细胞。
🛠传代培养步骤：
当细胞汇合度达到80%时，准备传代。
第一步：吸除旧培养液，用PBS轻轻冲洗细胞一次。
第二步：根据培养瓶大小，加入适量细胞解离溶液（T25瓶1ml，T75瓶3ml），37°C孵育10分钟。
第三步：显微镜下检查细胞解离情况。若细胞未脱落，吸除解离试剂，加入Accutase溶液。
第四步：观察细胞变化，当细胞变圆或轻拍后可脱落时，加入5ml完全培养基。
第五步：轻轻吹打，使细胞充分解离，然后将细胞悬液转移至无菌离心管中。
第六步：离心收集细胞，用10ml完全培养基重悬细胞沉淀。
第七步：将细胞悬液分配至2个T25培养瓶中，静置于培养箱。
📝 注意事项：
确保所有操作在无菌条件下进行。
观察细胞状态，避免过度处理导致细胞损伤。
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