特价细胞之ISK

Hey，今天我们来聊聊如何传代培养那些来自39岁子宫内膜腺癌女性患者的细胞，这些细胞可是大有来头，它们表达ER、PR，还能产生促肾上腺皮质激素释放激素、胎盘碱性磷酸酶和绒膜促性腺激素呢！🌟 下面就是传代培养的详细步骤，记得点赞收藏哦～🔥 传代培养步骤 细胞脱落时的处理：当细胞开始脱落，我们需要将培养液转移到无菌离心管中，然后进行离心（125g，3~5分钟）1000-1200rmp，收集那些悬浮细胞。由于漂浮细胞较少，可能没有沉淀，大部分细胞会附着在管壁上。 去除培养基：轻柔地去除培养基，然后将贴壁细胞消化收集在一起，混匀后进行接种。 贴壁细胞处理：首先，用PBS洗1~2次，每次3-5ml。然后，添加1ml 0.25%的胰酶（含EDTA）到细胞瓶中，轻轻摇匀，让胰酶溶液铺满细胞表面，放入培养箱中。1-3分钟后取出到显微镜下观察，如果细胞无变化则继续放入培养箱消化。一旦细胞变圆、轻拍瓶尾部，大部分细胞开始脱落，当70-80%细胞漂浮脱落时，立即加入5ml完全培养基（含10%FBS）中和。 细胞解离：用移液管轻轻吹打6-8次，使细胞充分解离。 细胞悬液处理：将细胞悬液转移到无菌离心管中，进行计数，然后离心收集细胞。用适量完全培养基重悬细胞沉淀，使细胞密度达到每毫升0.6-2x10^5。 接种新培养瓶：将细胞悬液转至培养瓶中，静置于培养箱中。建议T25培养瓶添加5-7ml完全培养基，之后2-3天进行换液。 以上就是传代培养的详细步骤啦，希望对你们有所帮助！如果有任何疑问，或者想要了解更多关于细胞培养的知识，记得留言讨论哦～👩‍🔬🧑‍🔬